Los anfolitos se utilizan para formar un gradiente de pH dentro del capilar, y las proteínas a separar migran (o se enfocan) a través del medio anfolito hasta que se descargan en su pI valores.
¿Por qué se usan anfolitos en IEF?
En IEF, los anfolitos se desplazan según su carga bajo la influencia de un campo eléctrico, en presencia de un gradiente de pH, hasta que la carga neta de la molécula es cero (ej., punto isoeléctrico, pI). … Incluso los anfolitos más simples (por ejemplo, los aminoácidos) pueden crear un gradiente de pH y actuar como un amortiguador isoeléctrico.
¿Por qué es importante el punto isoeléctrico?
El punto isoeléctrico es importante en la purificación de proteínas porque representa el pH donde la solubilidad suele ser mínima. … Este polímero tiene propiedades únicas para garantizar que las proteínas formen un gradiente de pH cuando se aplica un campo eléctrico en la solución.
¿Cómo crean los anfolitos un gradiente de pH?
En CIEF, se crea un gradiente de pH heterogéneo dentro del capilar aplicando voltaje a través de los anfolitos portadores La amplitud del gradiente de pH depende de qué serie de anfolitos se seleccione. Los anfolitos están disponibles comercialmente para cubrir rangos de pH amplios y estrechos, como se muestra en la Figura 5.2.
¿Qué es la química de los anfolitos?
Los anfolitos son compuestos que cuando se disuelven en agua (que es en sí un compuesto anfótero) pueden actuar como ácido o como base.
