El ensayo
Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) es un método utilizado para visualizar directamente la interacción proteína-proteína in vivo utilizando imágenes de células vivas o células fijas. … BiFC fue descrito por primera vez por Hu et al.
¿Cómo funciona la complementación de fluorescencia bimolecular?
El principio de funcionamiento de BiFC se basa en el desarrollo de un complejo fluorescente, como resultado de la asociación de dos segmentos de una proteína fluorescente cuando están muy próximos debido a la interacción proteína-proteína en los fragmentos, es decir, en BiFC, un fluoróforo se divide en extremos terminales amino y carboxilo.
¿Qué es la prueba BiFC?
ensayo bimolecular de complementación de fluorescencia (BiFC) permite la visualización simple y directa de las interacciones de proteínas en células vivas (45). El enfoque BiFC se basa en la formación de un complejo fluorescente cuando dos proteínas fusionadas con fragmentos no fluorescentes de una proteína fluorescente interactúan entre sí (Fig.
¿Por qué se realiza la prueba BiFC?
La idea de BiFC es expresar mitades de GFP fusionadas con sus proteínas de interés Si los puntos de interés interactúan, puede juntar ambas mitades para obtener una GFP funcional. Entonces, si hay la mitad de una GFP expresada en la célula, no me sorprende que un anticuerpo GFP pueda detectarla.
¿BiFC es reversible?
La irreversibilidad de los complejos BiFC ha sido bien documentada (10), y parecería que la mayoría, si no todos, los sistemas BiFC basados en proteínas fluorescentes son irreversibles (8, 33, 43, 48–51).
