Tabla de contenido:
- ¿Cómo se evitan las manchas de fondo?
- ¿Cómo optimizar la inmunofluorescencia?
- ¿Qué causa las manchas de fondo?
- ¿Los anticuerpos secundarios reducen las señales de fondo?
Video: ¿Cómo reducir la tinción de fondo en inmunofluorescencia?
2024 Autor: Fiona Howard | [email protected]. Última modificación: 2024-01-10 06:36
Para reducir la unión de anticuerpos no específicos y, en consecuencia, reducir la señal de fondo, se recomienda usar una solución de bloqueo antes de la incubación con anticuerpos La solución de bloqueo más eficaz será ser el que contiene suero de la misma especie en la que se generó el anticuerpo secundario.
¿Cómo se evitan las manchas de fondo?
Disminuir el grosor de las secciones de tejido puede ayudar a reducir las manchas de fondo. Intente cortar secciones más delgadas para una IHC más limpia. También es importante tener cuidado de no dejar que las secciones se sequen, ya que el secado puede provocar una tinción alta no específica.
¿Cómo optimizar la inmunofluorescencia?
Microscopía de inmunofluorescencia: 10 consejos técnicos para el éxito
- Fijación y Permeabilización celular. …
- Especificidad del anticuerpo. …
- Utilizando la dilución de anticuerpos adecuada. …
- Optimización de tampones y agentes de bloqueo. …
- Uso de una densidad celular adecuada. …
- Múltiples tinciones. …
- Anticuerpos secundarios. …
- Reducción del fondo.
¿Qué causa las manchas de fondo?
La tinción de fondo puede deberse a una unión inadecuada de anticuerpos o a errores durante la preparación del portaobjetos de tejido.
¿Los anticuerpos secundarios reducen las señales de fondo?
Los anticuerpos secundarios específicos de F(ab) pueden ayudar a reducir la señal de fondo al eliminar la unión no específica de las proteínas IgG que el anticuerpo secundario encuentra en los tejidos.
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