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¿Cuál es la mejor forma de separar los cloroplastos del tampón?

Tabla de contenido:

¿Cuál es la mejor forma de separar los cloroplastos del tampón?
¿Cuál es la mejor forma de separar los cloroplastos del tampón?

Video: ¿Cuál es la mejor forma de separar los cloroplastos del tampón?

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Video: ¿Cómo ponerse un tampón? 2024, Mayo
Anonim

Para poder extraer los pigmentos de Los cloroplastos se suspenden en un tampón de aislamiento. Para poder extraer los pigmentos de los cloroplastos, primero tenemos que deshacernos del tampón. ¿Cuál es la mejor forma de separar los cloroplastos del tampón? use una centrífuga para separar el

¿Cómo se aísla un cloroplasto?

En el método de aislamiento de cloroplastos, la pared celular se rompe mecánicamente usando una licuadora u homogeneizador. Luego, el tejido foliar intacto y los restos celulares se eliminan por filtración. Los cloroplastos se recogen por centrifugación utilizando un gradiente de percoll.

¿Cómo se hace un tampón de aislamiento de cloroplastos?

Preparar la cantidad requerida de tampón de aislamiento de cloroplasto 1X diluyendo el stock de tampón 2X 1:1 con agua dH2O Agregar 10 µL de la solución de BSA al 10 % por ml de cloroplasto 1X Tampón de aislamiento. Justo antes de usar, agregue 1 µl de DTT por 1 ml de tampón de aislamiento de cloroplasto. Etiquete este búfer como 'Búfer completo'.

¿Qué hay en un tampón de aislamiento de cloroplastos?

El tampón de aislamiento de ADN

constaba de NaCl 100 mM, Tris-HCl 100 mM (pH 8,0), EDTA 50 mM y DTT 1 mM La lisis del cloroplasto se obtuvo incubando el sedimento de cloroplasto con 8 ml de tampón de aislamiento de ADN, 1,5 ml de SDS al 20 %, 20 µl de 2-mercaptoetanol y 30 µl de proteinasa K (10 mg/ml) en un tubo de centrífuga a 55 °C durante 4 h.

¿Cuál es el pH del tampón utilizado para homogeneizar la hoja de espinaca en el protocolo de aislamiento de cloroplastos?

La espinaca está cargada de buenos cloroplastos y se aíslan fácilmente. Tendrás que poner las hojas en una batidora fría con tampón de fosfato 0,1 M, pH 7,5 y sacarosa 0,5 M para que no revienten.

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