¿Por qué cambiar el tiempo de retención en hplc?

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¿Por qué cambiar el tiempo de retención en hplc?
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Video: ¿Por qué cambiar el tiempo de retención en hplc?

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Anonim

Relacionados con el último fenómeno están los cambios en los tiempos de retención causados por un aumento de la contrapresión en la columna. El aumento de la contrapresión puede indicar una contaminación de la columna, pero incluso una frita obstruida puede afectar los tiempos de retención.

¿Qué causa el cambio de tiempo de retención?

Una de las causas más comunes de cambios en el tiempo de retención en las separaciones de LC de fase reversa es un cambio menor en la concentración del solvente orgánico, generalmente metanol o acetonitrilo Esto puede ocurrir por un error menor en la formulación o un cambio en la composición de la fase móvil si un solvente se evapora con el tiempo.

¿Qué aumenta el tiempo de retención?

Si la polaridad de la fase estacionaria y el compuesto son similares, el tiempo de retención aumenta porque el compuesto interactúa más fuerte con la fase estacionaria. Como resultado, los compuestos polares tienen tiempos de retención largos en las fases estacionarias polares y tiempos de retención más cortos en las columnas no polares que usan la misma temperatura.

¿Qué factores influyen en el tiempo de retención?

El tiempo de retención depende de muchos factores: condiciones de análisis, tipo de columna, dimensión de la columna, degradación de la columna, existencia de puntos activos como la contaminación. y así. Si cita un ejemplo familiar, todos los picos aparecen en tiempos más cortos cuando corta parte de la columna.

¿Qué afecta el tiempo de retención en la cromatografía?

Un cambio en el programa de temperatura a menudo provoca un cambio en el tiempo de retención de todos los picos. Un cambio en la temperatura inicial, el tiempo de retención inicial o la velocidad de rampa pueden afectar todos los picos. Los tiempos de retención aumentan con una temperatura inicial más baja, un tiempo de retención inicial más largo o una velocidad de rampa más lenta.

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