Vortexing no cortará su ARN para que no se pueda usar si está haciendo RT de cebado aleatorio, solo si desea clonar ARNm largo. El soporte técnico de Invitrogen también es correcto. El cloroformo es más pesado que el trizol y se hundirá hasta el fondo del tubo.
¿Es seguro agitar en vórtice el ARN?
• No agite en vórtex los lisados de Trizol ni las muestras de ARN para evitar el cizallamiento. Después de la extracción, mantenga las muestras de ARN en hielo en todo momento. Este protocolo está diseñado para muestras lisadas de 1 ml de Trizol en un tubo de 1,5 o 2 ml.
¿Se puede calentar el ARN?
Por lo tanto, evite las altas temperaturas ( por encima de +65°C) ya que afectan la integridad del ARN. En su lugar, para derretir las estructuras secundarias, caliente el ARN a +65 °C durante 15 minutos en presencia de tampones desnaturalizantes.
¿Cómo se resuspenden los gránulos de ARN?
resuspenda su gránulo con agua tibia (40-50 grados centígrados). incubar a 45 grados centígrados durante 10 minutos. ponerlos en +4 durante 4-6 horas.
¿Cómo se precipita el ARN?
A.
Después de ajustar la concentración de sal, el ARN se puede precipitar agregando 2,5 volúmenes de etanol o 1 volumen de isopropanol y mezclando bien, seguido de enfriamiento durante al menos 15 minutos a -20° C.
